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Hi T7 RNA Polymerase

更新時間:2024-12-06

簡要描述:

Hi T7 RNA Polymerase儲存:置于-20°C 可保存 2 年,如有白色沉淀析出,37°C溫浴 5min 后使用,不影響性能。

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公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

商品屬性

貨號

產品名稱

規格

P-PR1295

Hi T7 RNA Polymerase

10KU

產品介紹:

Hi T7 RNA Polymerase 對 T7 噬菌體啟動子具有高度的特異性,并可以其作為啟動子,DNA 作為模板體外合成正義鏈。雙鏈線性質粒 DNA、PCR 產物均可作為該酶的底物模板。Hi T7 RNA 聚合酶經電子重構架及庫篩選,與 Wild型比較來看,酶的 DNA 模板結合區域親和力更高,使其具有持續合成能力,從而獲得更高的產量,并易于長片段RNA 的合成。該酶為重組純化制品,無 DNase 和 RNase污染。
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活性定義:在標準反應體系下,37℃ 1 小時內將 1 nmol的 ATP 摻入酸不溶物所需要的酶量定義為一個活性單位。
儲存:置于-20°C 可保存 2 年,如有白色沉淀析出,37°C溫浴 5min 后使用,不影響性能。
熱失活:75°C,10min。
image.png

2. 37℃孵育 2-3h (通常 3h,即可獲得>80 μg 的總產量)。
3. 反應完畢后,如需去除模板 DNA,加入 Dnase I(2U)37℃處理 15min。
4. 終止反應:75℃加熱 10min,或加入 2 μl 0.5M 的 EDTA(pH8.0)。
注意事項
1.質粒DNA的質量影響RNA的量和完整性。質粒DNA的濃度越高,生成RNA的質量越高,質粒模板DNA應該無RNase污染.
2.該酶為高產酶,RNA 產量高,在反應完畢后,通常存在肉眼可見的渾濁狀態,其為反應副產物焦磷酸鎂,此時表明反應劇烈。在下一步 RNA 純化前,可通過短暫離心去除沉淀物,此過程并不丟失 RNA。
3. 通常轉錄后 RNA 產物濃度在 2-4 μg/μl,因此電泳時,僅需取 0.05-0.1 μl 即可。

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